血清使用小技巧 | 如何保證血清活性？解凍和儲(chǔ)存方法很重要！

作為一名細(xì)胞培養(yǎng)大戶，你是不是經(jīng)常會(huì)糾結(jié)上面這些問題？畢竟血清這種金貴的東西，可得好好珍惜，一個(gè)不小心，就可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，免不了要被導(dǎo)師責(zé)備。

那這些問題到底應(yīng)該怎樣解決？有沒有標(biāo)準(zhǔn)答案？身為一個(gè)資深的代理商，關(guān)于血清的儲(chǔ)存和解凍問題我們可是有好好研究過的。

如果你也存在同樣的疑惑，那就請(qǐng)接著往下看吧。

首先，剛到貨的血清，趁著它還凍手，趕緊放進(jìn)-20℃冰箱中，避免反復(fù)凍融。當(dāng)然，如果你的課題組不差錢，-80℃冰箱空間充足，把血清儲(chǔ)存進(jìn)去也是沒有問題的。

很多同學(xué)會(huì)說，不就是解凍血清嘛，這題我會(huì)！

emmm……怎么說呢，直接在4℃冰箱里過夜融化的方法，雖然很多人在這么用，但還是有一些潛在的風(fēng)險(xiǎn)的。

我們都知道，在血清這種混合物中，融化速度：蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類溶劑，所以蛋白質(zhì)會(huì)率先溶解析出，而水還是結(jié)成冰的狀態(tài)，導(dǎo)致瓶子中間會(huì)出現(xiàn)一根透明的冰柱，而周圍則會(huì)呈現(xiàn)上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài)，在使用過程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過高等問題，影響細(xì)胞生長。

更重要的一點(diǎn)是，血清中珍貴的生長因子等活性物質(zhì)，它們?cè)诮鈨鲞^程中，有著與細(xì)胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷，都需要快速解凍才能**程度地保留生物活性。顯然，4℃過夜這樣的長時(shí)間處理，很有可能會(huì)導(dǎo)致一部分「營養(yǎng)成分」的損失，影響細(xì)胞生長。

所以，為了更好地保留血清中的活性成分，使細(xì)胞培養(yǎng)更穩(wěn)定，我們推薦使用三步法溶解，具體方法見下表，有需要的同學(xué)可以截圖保存。

如果是儲(chǔ)存在-80℃的血清，則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中（至少24小時(shí)），再使用三步法溶解，避免溫差過大使血清失活。

徹底解凍血清后，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲(chǔ)存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候，再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用（**能全部配成培養(yǎng)基，不要有剩余），可以有效避免反復(fù)凍融的問題（遵循現(xiàn)用現(xiàn)配、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則）。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲(chǔ)存。

看到這里，問題又來了，配好的培養(yǎng)基，或者剩下的那一點(diǎn)點(diǎn)血清，能在4℃冰箱里放多久呢？

先給出我們認(rèn)為比較合理的答案，再來解釋原因：

一般情況下，已經(jīng)解凍的血清，無論是配成完全培養(yǎng)基還是在冰箱里備用，都不要超過一周（7天），原因也很簡(jiǎn)單，存放太久，生長因子等物質(zhì)容易失活，而且比較容易受到污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

不知道今天這期內(nèi)容有沒有解決大家的疑惑，無論是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都不算便宜，這么貴巴巴的試劑，還請(qǐng)小心使用，讓它們的功效**化，可不能讓銀子白花！

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