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PCR實驗室防核酸污染清除方法

2024-01-09 16:21
文章附圖

導(dǎo)致PCR實驗出現(xiàn)實驗假陽性、結(jié)果不可信、研發(fā)不可靠的重要因素就是DNA氣溶膠污染,PCR 實驗室應(yīng)當(dāng)將防污染作為日常管理、實驗安排、清潔消毒、實驗習(xí)慣的核心。PCR 實驗污染和細(xì)胞污染是有差別的,PCR 實驗污染主要是核酸而不是細(xì)菌和其他入侵者。因此所有的預(yù)防措施都會稍稍有所不同。今天給大家介紹一下 PCR 實驗室的主要污染來源、實驗中如何避免和減少污染的可能性及PCR實驗室防核酸污染清除方法。

1、樣本間交叉污染
收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。

2、實驗試劑污染

主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。 加樣過程中,因為 PCR 試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得 PCR 試劑和 PCR / 管處于 0℃,但這個過程也是充滿了污染的風(fēng)險的。

3、擴增產(chǎn)物污染
大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴增后的 PCR 反應(yīng)管意外開蓋,這是 PCR 反應(yīng)中最主要最常見的污染問題。因為 PCR 產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 PCR 檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的 PCR 產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。

4、克隆質(zhì)粒污染作為陽性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。

北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代理的 德國MB 產(chǎn)品 PCR Clean   PCR 核酸污染祛除噴霧劑(帶噴嘴)

PCR CLean Spray.png

在PCR實驗室中,DNA污染很難徹底清除。即使只有一個污染的DNA分子被檢測到,也會使整個PCR檢測過程出現(xiàn)誤差。

為確保PCR試驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,預(yù)防DNARNA交叉污染,PCR實驗室大多會常備DNA/RNA污染清除劑。

核酸污染祛除噴霧劑特點

1.可有效地降解大多數(shù)表面上(輕質(zhì)金屬或有色金屬除外)的擴增子,質(zhì)?;蚧蚪MDNARNA。該產(chǎn)品還能有效地去除DNA酶和RNA酶。     

2.可直接使用。

3.保護(hù)實驗人員,避免接觸DNA污染。

4.非堿性,無致癌性,成分安全。

PCR Clean?核酸污染祛除噴霧劑使用方法

1.PCR Clean?噴在操作臺表面,反應(yīng)1分鐘后,即可用干凈紙巾擦干試劑。注意:如果沒有擦拭干凈,液體揮發(fā)后表面可能有白色殘留,影響美觀。此時可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處,然后擦拭即可。

2.對于移液器要祛除DNA/RNA污染時,請按照說明書拆開移液器,將移液器桿軸浸泡在PCR Clean?噴霧劑中,1分鐘后取出后用水沖洗,晾干,重新組合。

3.將PCR Clean?桶裝,可用于補充到噴霧劑瓶中,或用于潔凈間地板等大面積清除DNA/RNA污染。

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