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細胞有支原體污染影響做實驗嗎

2024-02-28 14:29

細胞受到支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。支原體污染可能導(dǎo)致細胞形態(tài)學的變化,如細胞大小和形狀的不規(guī)則變化,細胞膜的破壞等。此外,支原體還會抑制細胞生長,導(dǎo)致染色體畸變,細胞膜抗原性改變,以及細胞復(fù)蘇后存活率降低等。這些變化可能會影響實驗結(jié)果的解釋和數(shù)據(jù)的可靠性。下面四個研究揭示「支原體污染」對細胞實驗的影響。

影響細胞脂類代謝

研究人員以不同濃度的肺炎支原體處理人肺癌上皮細胞,不同時間后提取胞膜及表面的鞘脂類,應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸附飛行時間質(zhì)譜一進行分析應(yīng)用RT-PCR和免疫熒光方法,檢測鞘脂類代謝通路中兩個關(guān)鍵酶的變化。

實驗結(jié)果:

肺炎支原體和細胞大多數(shù)鞘脂類組成成分相同;感染能影響細胞的鞘脂類代謝,包括誘導(dǎo)新種類的神經(jīng)酞胺的生成,升高或降低某些神經(jīng)酞胺的濃度,在一定濃度和時間點能誘導(dǎo)酸性鞘磷脂酶的聚簇和絲氨酸棕擱酞轉(zhuǎn)移酶的變化。

對黑色素瘤細胞的影響

在研究早期傳代黑色素瘤細胞系中的干細胞樣特性時,研究人員注意到感染了豬鼻支原體的細胞系的實驗組的可重復(fù)性差。

研究人員用支原體感染其他黑色素瘤細胞系.研究發(fā)現(xiàn),支原體感染在培養(yǎng)中會產(chǎn)生多形性效應(yīng),從細胞凋亡到增強的致瘤性和侵襲性,并且會造成相當大的資源浪費和實驗結(jié)果解釋的混亂[2]。

誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生炎癥因子

在一項研究中,研究人員利用肺炎支原體感染A549細胞。

研究發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn),肺炎支原體能刺激A549細胞分泌TNF-α, 其產(chǎn)生水平與刺激時間具有量的正相關(guān)性;肺炎支原體還能刺激A549細胞分泌IL-8, 其產(chǎn)生水平與刺激時間亦具有量的正相關(guān)性。而被支原體感染的A549細胞分泌TNF-α和IL-8可能與NF-κB的激活有關(guān)。

誘導(dǎo)細胞氧化應(yīng)激

在這項研究中,研究人員利用多巴胺能神經(jīng)元細胞系(BE-M17),使用單細胞凝膠電泳(彗星試驗),來評估支原體感染對基因組不穩(wěn)定性和堿基切除修復(fù)(BER)活性的影響。

結(jié)果表明,與未感染的細胞相比,支原體感染在沒有炎癥反應(yīng)的情況下誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,DNA損傷水平(鏈斷裂/堿不穩(wěn)定位點(SB/ALS)和氧化嘌呤)顯著增加。未感染細胞修復(fù)SB/ALS的速度比感染細胞更快。未感染的細胞在24小時內(nèi)就能修復(fù)氧化嘌呤,而感染的細胞在30小時后也不能修復(fù)。

總之,本研究表明,支原體感染不僅會誘導(dǎo)氧化應(yīng)激和DNA損傷,而且還會降低負責氧化損傷DNA修復(fù)的主要途徑,即BER的效率

[1]郁園園. 肺炎支原體感染干擾人肺癌上皮細胞A549的脂類代謝[D],2008.

[2]Ji Y, Karbaschi M, Cooke MS. Mycoplasma infection of cultured cells induces oxidative stress and attenuates cellular base excision repair activity. Mutat Res Genet Toxicol Environ Mutagen. 2019;845:403054. doi:10.1016/j.mrgentox.2019.05.010

[3]肺炎支原體誘導(dǎo)A549細胞分泌腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-8的相關(guān)性[J],2009,30(02):188-190+194.


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